液相色谱仪等度和梯度有什么区别及配置建议
发布时间:2017/11/9 11:35:56 关注量:1040
等度洗脱是指液相色谱仪实验过程中(做样过程)从头到尾只用一种流动相。也就是只用一个泵,输送同一种流动相。
梯度洗脱是指液相色谱仪同一个分析周期中随着时间的变化按一定程序梯度性地改变洗脱液的比例(浓度配比、成分、离子强度、溶液极性等)或pH,以期将层析柱上不同的组分洗脱出来的方法。从而可以使一个复杂样品中性质(极性)差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。梯度洗脱一般分为二元高压梯度,二元低压梯度和四元低压梯度;二元高压梯度需要两台高压泵,二元低压梯度和四元低压梯度都是只需 要一台高压泵和一个比列阀。
配置建议:
1.采样高效液相色谱法实验时,对液相色谱仪的配置一般尽量简单。仪器配置复杂后,操作就会复杂,稳定性、准确度可能会受影响,故障率就会高,使用成本也会高。在能达到较好的分离度及峰形的情况下能用等度就用等度;
2.同时检测多种复杂成分,或是有干扰物的情况下,为达到满意的峰形、分离度、分析时间,就得使用梯度洗脱方式了。各种成分可以使用不同比例的流动相进行洗脱,如农残检测、氨基酸检测等。要求高的话采用高压梯度洗脱,要求低的话采用低压梯度洗脱;
3.流动相种类相对简单的话采用二元低压梯度洗脱,相对复杂的话(如洗脱时需要四种不同溶液的流动相)采用四元低压梯度洗脱。
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